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    [产品]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2023-09-04
    摘要 X-WvKH(=w  
    R')GQ.yYq  
     @"5u~o')@v  
                                                                           Q%h o[KU  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 s'w 0pZqj  
    -$p-o Z)  
    任务说明                                                                           ,6)y4=8 L  
    tH!z7VZ  
     eW<hC (  
    PQay sdb  
    多重光源                                                                           AY erz  
       >U.uRq  
    Darkj>$\  
     Q&;qFv5-l  
    螺旋相位板                                                                           t`{Fnf  
    ^9E(8DD  
     4h(Hy&1C  
    \rO>F E  
    探测器插件                                                                           mY9K)]8  
    vnpX-c  
     mK4A/bsE  
    ^5F/=TtE G  
    参数运行 XCoOs<O:@  
    E$ rSrT(  
                                                                                 %m`QnRX?D  
    $4]PN2d&  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： $x*GvI1D  
    9IV WbJ  
    Usage of the Parameter Run Document x.Y,]wis  
                                                                                     /0(KKZ)  
    非时序建模 ualtIHXK)  
    29oEkaX2o  
                                                                               NM]/OKs'H  
    )2S\:&x  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 ' r/1+.  
    cCIEG e6  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing T rW3@@}j  
                                                                                     WP9=@X Z  
    总结 – 组件…           vP!gLN]TV  
    "-sz7}Mb  
                                                                     5o*x?P!$  
    =*I9qjla[?  
    )C[8#Q-:  
     /VQ<}S[k}-  
    系统观感 ak zb<aT  
    D? ($R9t  
                                                                         $si2H8  
    U\N`[k.F  
    %Vq@WF  
    发射&损耗激光 9Z=Bs)-y.  
    wC19  
                                                                                 6m9Z5:xG  
    )u$A!+fo  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 &AzA0r&,  
    BmZd,}{  
                                                                                     {,m!%FDL  
    3D STED 轮廓 kciH  
    ^>>Naid  
                   +Fk.B@KT,  
                                                             d%<Uh(+:  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 p&7>G-.  
    /2c?+04+  
    受激发射损耗效应                                                                           ^vzNs>eJ  
    5i0<BZDTef  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 [mhY_Hmz]  
    wi!Ml4Sb  
    [p(Y|~  
     {w2<;YXj!  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           7%X$6N-X  
    Cu}Rq!9i  
     r8mE   
                                                                                     PS>k67sI  
    文件信息 s3q65%D  
    [Ga 9^e$Zv  
    mFT[[Z#  
     ?R";EnD  
    进一步阅读 =!7yX ;|  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     zD?<m J`  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy |[gnWNdR$M  
    /7*u!CNm  
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    WFtxEIrl3j  
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