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    [产品]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2023-09-04
    摘要 YU'k#\gi*  
    3<e=g)F  
     #>a\>iKQ2q  
                                                                           I }a`0Y&{  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 XnH05LQ  
    \ ,'m</o~,  
    任务说明                                                                           0.Q Ujw  
    U"~>jZKk  
     'NbHa!  
    F;Spi  
    多重光源                                                                           F0m-23[H  
       K6)Gc%:`  
    xBj 9y u  
     N_LM/of|D  
    螺旋相位板                                                                           ?=u\n;w)  
    x f'V{9*  
     Ky`qskvu  
    ;_XFo&@  
    探测器插件                                                                           !K#qeY}  
    %6t:(z  
      }t!Gey  
    ;'gWu  
    参数运行 \Zb;'eDv  
    qRu~$K  
                                                                                 2zX]\s?3  
    k<z )WNBf  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： M.JA.I@XC  
    Q1lyj7c#x  
    Usage of the Parameter Run Document PgAf\.48a  
                                                                                     .zf~.R;>  
    非时序建模 o]odxr  
    y1z4ik)Sd@  
                                                                               {aZ0;  
    *nd!)t  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 v<k?Vu  
    (xycJ`N  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing j<upRS,$  
                                                                                     -$\y_?}  
    总结 – 组件…           k``_EiV4t  
    REQ\>UO_  
                                                                     @ 8(q$  
    L]7=?vN=8  
    @?ebuj5{e  
     zE*li`@  
    系统观感 \Zk;ikEY  
    C-xr"]#]  
                                                                         *9 {PEx  
    O}gV`q;  
    5; C|  
    发射&损耗激光 ]dVGUG8  
    t6rRU~;}  
                                                                                 0^ _uV9r  
    0J*??g-n  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 =<C: d  
    P-[-pi@  
                                                                                     v4<nI;Ux  
    3D STED 轮廓 v@sIHb  
     OHN_  
                   SZ7:u895E  
                                                             A.F%Ycq  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 '$Dn  
    t mn tp  
    受激发射损耗效应                                                                           3=#<X-);  
    PxX 4[ P  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 goNG' o %|  
    q~Hn -5H4Q  
    4IK( 7  
     O ;Rqv  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           E*& vy  
    ;7*[Bcj.  
     t3WiomNCc  
                                                                                     F~ty!(c  
    文件信息 U)TUOwF  
    E, Z$pKL?  
    @3i\%R)n;  
     j8i[ONq^  
    进一步阅读 t|?ez4/{z  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     d7^}tM  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy sFKX-S~:  
    HdI8f!X'TG  
    市场图片 Ep_HcX`  
    Z{.8^u1I  
     ZmqKQO  
     
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