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    [产品]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2023-09-04
    摘要 F`CDv5  
    o.wXaS8  
     SK 5__Ix  
                                                                           r=#v@]z B  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 ,qj M1xkL$  
    F]cc?r312  
    任务说明                                                                           kH?PEA! \  
    qdo_YPG  
     >nO[5  
    j43i:c;F  
    多重光源                                                                           Awe'MGp%  
       -qG7,t  
    WnhH]WY  
     '![VA8  
    螺旋相位板                                                                           5hfx2 O)  
    (zw.?ADPCT  
     H[N~)3x  
    0yxwsBLy  
    探测器插件                                                                           q#`;G,rs  
    dTqL[?wH?  
     O@>{%u  
    L#fSP  
    参数运行 -^t&U] g  
    %>t4ib_8  
                                                                                 EUS^Gtc  
    - XB[2h  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： ;Bat--K7+  
    M1I4Ot  
    Usage of the Parameter Run Document !X 0 (4^  
                                                                                     :|Bzbn=N2  
    非时序建模 z5W;-sCz  
    |T{ZDJ+  
                                                                               ^9XAWj"  
    7eG@)5Uy  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 Tvw(S q};  
    *oAnG:J+M  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing ._<gc;G  
                                                                                     h8P_/.+g|V  
    总结 – 组件…           *-gmWATC6  
    yn04[PN2  
                                                                     '8b=4mrbH  
    q,]57s  
    29NP!W /g  
     [yVcH3GcjI  
    系统观感 .&/A!3pW  
    u HXb=U  
                                                                         3Z74&a$  
    ^@]yiED{g  
    sVP2$?  
    发射&损耗激光 #J%Fi).^)  
    /_r{7Gq.  
                                                                                 fw0Z- 9*  
    EiWd =jDm  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 K555z+,'e  
    /P*ph0S-  
                                                                                     qb5IpI{U  
    3D STED 轮廓 #}xPOz7:  
    >IHf5})R  
                   VqeW;8&*iv  
                                                             CxVrnb[`q  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 6/Z 8/PL  
    qGie~S ##  
    受激发射损耗效应                                                                           fwaM;YN_  
    0*o=JM]  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 IF3V5Q  
    ~T&X#i  
    KQ.cd]6  
     NjSjE_S2B8  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           ;\t(c  
    Y+"Gx;F>  
     %$F\o1S  
                                                                                     r'u[>uY  
    文件信息 m ,TYF  
    dH0wVI<z  
    FBrJVaF  
     <nn!9V\C   
    进一步阅读 '8fL)Zk  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     9wv 7 HD|  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy kk3G~o +  
    XwdehyPhT2  
    市场图片 P87qUC  
    z#sSLE.$Z  
     Xr pnc 7  
     
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