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    [产品]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2023-09-04
    摘要 bk-veJR  
    (W~')A"hC'  
    8<Y*@1*j  
                                                                      
    6,707h  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术,以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中,两束激光—一束正常,一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应,与通常的显微镜技术(例如,宽视场显微镜)相比,后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中,介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应,在焦点区域采用等效孔径。 KZ"&c~[  
    0.9%m7.m  
    任务说明                                                                           b=5"*=T{+  
    @MS}tZ5  
    _%xe:X+ M  
    xIN&>D'|N  
    多重光源                                                                           TJHab;7F  
       DcO$&)Eb  
    {W[OjPC~F  
    m M> L0  
    螺旋相位板                                                                           T=EHue$  
    %[<@$qP  
    yBJf'-K  
    'UYxVh9D  
    探测器插件                                                                           -A?6)ggf.  
    4@b~)av)  
    JH4hy9i  
    )O xsasn)M  
    参数运行 K/Q%tr1W0  
    :7,j%ELic  
                                                                            
    $Z{ap  
    3tO=   
    为了实现焦点区域的z-扫描,可以执行参数运行。使用此工具,用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息,请参阅: e5g# a}  
    vn]e`O>y  
    Usage of the Parameter Run Document qT<OiIMj^  
                                                                                     78=a^gRB  
    非时序建模 'F\@KE -d  
    M+7&kt0;  
                                                                          
    \iBEyr]  
    I`$"6 Xy  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后,用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时,将对活动光路进行初步分析(通过所谓的Light Path Finder)。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 *{t]fds  
    lUL6L 4m  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing W E-cq1)  
                                                                                     N(6Q`zs  
    总结 – 组件…           q X"Pg  
    3 #8bG(  
                                                                
    | ODi[~y  
    /IO<TF(X  
    HX;JO[0  
    #~_ZG% u  
    系统观感 GOKca%DT=  
    `X["Bgk$!T  
                                                                    
    c Y C@@?  
    m-< "`:+  
    ;?{N=x8  
    发射&损耗激光 oMb&a0-7u  
    ]4uY<9VL  
                                                                            
    qZV.~F+  
    g< F7UA  
    光在焦点区域中的传播表明,来自损耗激光的光会产生环形光斑,其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争,这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 ^$N}[1   
    (bX77 Xr  
                                                                                     K P1;u#v  
    3D STED 轮廓 !08\w@  
    q':P9 o*N?  
                   U.$7=Zl8t  
                                                        
    ?;bsg 9  
    注意:由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应,我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 P^)J^{r  
    PnUYL.v  
    受激发射损耗效应                                                                           LX!MDZz  
    iI]E%H}  
    为了近似饱和损耗的影响,我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓(600nm 直径,25% 边缘)。通过系统传播回探测器平面表明,由于这个过程,光斑变得非常小。 pV^(8!+  
    R v/=bY  
    ;8~tt I  
    ;Y^.SR"  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           (lz Z=T  
    [ T6MaP?  
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    文件信息 $`wo8A|)  
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