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    [产品]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    科学家
     
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    只看楼主 正序阅读 楼主  发表于: 2023-09-04
    摘要 _4x[}e7KF  
    dBi3ZC AF  
     o<eWg  
                                                                           P PIG?fK)  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 II f >z_m  
    pCud` :o"  
    任务说明                                                                           "}y3@ M^  
    /=O+/)l`  
     Dv\:b*  
    E]e[Ty1  
    多重光源                                                                           J*W;{Vty  
       Y9c9/_CSj  
    B39PDJ]hu  
     \T#(rt\j  
    螺旋相位板                                                                           c)P%O  
    }E\+e!'!2  
     4s+J-l  
    5eZg+ O  
    探测器插件                                                                           2%No>w}/2  
    nR|uAw  
     -uY:2  
    4mg 7f^[+  
    参数运行 "Qm~;x2kB  
    A`ertSlbhe  
                                                                                 2K7:gd8Ru  
    =S7C(;=4  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： J&0wl]w|O%  
    m{=~| I  
    Usage of the Parameter Run Document R~mMGz  
                                                                                     jwE(]u  
    非时序建模 U3R`mHr0  
    BtBt>r(*  
                                                                               dUVTQ18F  
    j$i8@]  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 \#*;H|U.x  
    -,CndRKx  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing 'H-YFB$l  
                                                                                     ba:du |Ec  
    总结 – 组件…           LYo7?rp  
    >IydXmTy  
                                                                     5r}(|86O/  
    V?=zuB?'  
    nhaoh!8A6  
     ve/6-J!5Y.  
    系统观感 vWfef~}~  
    aNf3 R;*  
                                                                         sn-+F%[  
    (Y@|h%1W  
    :s5<AT Q  
    发射&损耗激光 N#-\JlJ)  
    )ZT0zIG  
                                                                                 N`GwL aF  
    nf@u7*# 6  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 ?ut juMdl  
    rVW'KN  
                                                                                     Vy*Z"k  
    3D STED 轮廓 S{|)9EKw  
    iKTU28x  
                   Dve5m=  
                                                             745V!#3!M  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 :s985sEv  
    #)eJz1~  
    受激发射损耗效应                                                                           Z8_gI[Zn  
    X{5DPhB,  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 > <[.  
    `-`iS?  
    %l P   
     bM_(`]&*  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           ZpBH;{.,  
    6_ 0w>  
     b4OR`dd*J  
                                                                                     . zMM86c  
    文件信息 q`K-T _<  
    VNot4 62L  
    &x5ZEe4  
     s3%8W==rBW  
    进一步阅读 `lOoT  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     V zx(J)  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy &H>dE]Hq,  
    =_:L wmI  
    市场图片 C)kQi2T  
    8-lY6M\R\  
     FDC{8e  
     
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