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    [产品]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    科学家
     
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    光币
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    光券
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2023-09-04
    摘要 @Q=P6Rz {S  
    LE" t'R   
     96&Y  
                                                                           hjgxCSp  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 oiS>:de%tc  
    DsY$  
    任务说明                                                                           8#S}.|"?F  
    qC%[J:RwF  
     P 3CzX48^  
    ``:AF:  
    多重光源                                                                           U;_b4S:  
       LcA~a<_  
    LD~s@}yH>  
     aC&ZV}8of  
    螺旋相位板                                                                           -C7IUat<  
    P0En&g+~  
     ?rD`'B  
    6#JdQ[IP6  
    探测器插件                                                                           R`RLq1WA  
    B f_oIc  
     nA\9UD<G.  
    f.o,VVYi  
    参数运行 -%U 15W;  
    Tu'/XUs;k  
                                                                                 5nGDt~a  
    8"#Ix1#  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： ?`nF"u>  
    g36\%L  
    Usage of the Parameter Run Document }Ot I8;>  
                                                                                     _PPW9US{  
    非时序建模 jQKlJi2xu  
    fDn|o"  
                                                                               ^Fl6-|^~  
    )m-l&UK  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 Q/%(&4>'y  
    `FP)-^A8  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing 6T}bD[h4?  
                                                                                     5PJB<M_m:  
    总结 – 组件…           :\*<EIk(  
    }+L!r53g6  
                                                                     r~sx] =/  
    R?Dbv'lp>  
    93Yo }6>  
     QL>G-Rp  
    系统观感 G36}4  
    (;V=A4F-D  
                                                                         0.}Um  
    ,_ XDCu @  
    |EJ&s393&  
    发射&损耗激光 S^GB\uJ  
    >A$J5B >d  
                                                                                 s<I[)FQVr  
    +$#YW5wy  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 qIwI]ub~  
    sOJH$G3O  
                                                                                     _jw A_  
    3D STED 轮廓 8+&] q#W3  
    No)v&P%  
                   7L[HtwI  
                                                             gc:qqJi)X  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 Ul?Ha{ W  
    t5z6{`  
    受激发射损耗效应                                                                           J~5VL |ca  
    gY], (*v  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 5#zwd oQ  
    2kTLj2 @o,  
    .,:700n+^  
     /;M0tP  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           R|T_9/#)  
    %C= {\]-2~  
     uc?QS~H&w  
                                                                                     D?rQQxb  
    文件信息 bA-=au?o5  
    6&=xu|M<x=  
    =:U63  
     h:[PO6GdX  
    进一步阅读 D-.XSIEMu  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     B.&ly/d  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy eR(PY{  
    Q)}sX6TB  
    市场图片 rN)T xH&*p  
    "Hmo`EB0  
     tw8@&8"  
     
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