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    [产品]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2023-09-04
    摘要 x\e;+ubt}  
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    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术,以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中,两束激光—一束正常,一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应,与通常的显微镜技术(例如,宽视场显微镜)相比,后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中,介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应,在焦点区域采用等效孔径。 9# 4Y1LS)  
    @oP_;G  
    任务说明                                                                           y;cUl, :v  
    8LkP)]4^sO  
    .R*!aK  
    `$LWmm#  
    多重光源                                                                           N;oQ^B'  
       -/C)l)V}  
    2zSG&",2D  
    %q ;jVj[  
    螺旋相位板                                                                           ocbB&  
    ZIR0PQh\  
    O=cxNy-I  
    /PBaIoJE  
    探测器插件                                                                           b3-e R5U/  
    }T^cEfX  
    Gc]~w D$  
    Y/<lWbj*A  
    参数运行 )4U> !KrY  
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    f*{ YFg?*&  
    vr^~yEr  
    为了实现焦点区域的z-扫描,可以执行参数运行。使用此工具,用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息,请参阅: 8b.u'r174  
     MTER(L  
    Usage of the Parameter Run Document WL,&-*JAW  
                                                                                     \6?A!w~6  
    非时序建模 *_Z#O,  
    o; a:Dd  
                                                                          
    >7`<!YJkK  
    1 2++RkL#  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后,用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时,将对活动光路进行初步分析(通过所谓的Light Path Finder)。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 L TV{{Z+  
    1(Y7mM8\  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing c3*t_!@oC  
                                                                                     NgCuFL(Ic  
    总结 – 组件…           Yb i%od&  
    o}Odw;  
                                                                
    4to% `)]  
    Sd/?&  
    v8gdU7Ll,  
    $8USyGi3J  
    系统观感 (iJ1 ;x  
    /&& 2u7*  
                                                                    
    Z@8vL  
    'bGX-C  
    $&s=68  
    发射&损耗激光 |6UtW{2I/  
    "Td`AuP@,  
                                                                            
    c^rOImZ  
    C 3hv*  
    光在焦点区域中的传播表明,来自损耗激光的光会产生环形光斑,其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争,这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 [%50/_h  
    .@-9'<K?~  
                                                                                     Nw&!}#m  
    3D STED 轮廓 `nKH"TaX  
    KfBTL!0#  
                   YSJy`  
                                                        
    +x9cT G  
    注意:由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应,我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 L@75- T  
    PkE5|d*,  
    受激发射损耗效应                                                                           di)*-+  
    B/5=]R  
    为了近似饱和损耗的影响,我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓(600nm 直径,25% 边缘)。通过系统传播回探测器平面表明,由于这个过程,光斑变得非常小。 A7! g  
    mNf8kwr  
    g~7Ri-"  
    n9pN6,o+  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           4L-:*b_v\  
    AM"Nn L"  
    D'Z|}(d&  
                                                                                     ,*4p?|A  
    文件信息 Z3k(P  
    O3N0YGhJ  
    a9n^WOJ6  
    6:U$w7P0 e  
    进一步阅读 _, ;j7%j  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF
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    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy 2f U$J>Y  
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    fgNU03jp^x  
    d!KsNkk  
     
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