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    [产品]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2023-09-04
    摘要 *QWOW g4w  
    C96*,.j~'  
    _[rQt8zn  
                                                                      
    !G[%; d  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术,以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中,两束激光—一束正常,一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应,与通常的显微镜技术(例如,宽视场显微镜)相比,后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中,介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应,在焦点区域采用等效孔径。 /5"T46jD  
    $ (xdF  
    任务说明                                                                           H lM7^3(&  
    ?E+f<jol  
    );JWrkpz  
    mIDVN  
    多重光源                                                                           \xl$z *zI  
       lVq5>:'}^;  
    kRwUR34yc  
    Ee7+ob  
    螺旋相位板                                                                           GH-Fqz  
    uKXD(lzX  
    GiM-8y~  
    M&29J  
    探测器插件                                                                           ];6955I!  
    czu9a"M>X  
    NyRa.hgZ;  
    z#PaQp5F  
    参数运行 3Og}_  
    3<M yb  
                                                                            
    Zr2T^p5u  
    !vJ$$o6#  
    为了实现焦点区域的z-扫描,可以执行参数运行。使用此工具,用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息,请参阅: |?{V-L  
    cAwqIihZ  
    Usage of the Parameter Run Document w}OBp^V^  
                                                                                     l5VRdZ4Uf  
    非时序建模 46e?%0(  
     dm=?o  
                                                                          
    uQx/o ^  
    S ;rd0+J  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后,用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时,将对活动光路进行初步分析(通过所谓的Light Path Finder)。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 *VJISJC  
    zng.(]U/?H  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing *U$]U0M  
                                                                                     *<67h*|)  
    总结 – 组件…           =M*pym]QSY  
    '1b)(IW  
                                                                
    #>)z}a]  
    TB.>?*<n]  
    P/1YN  
    #;^UW  
    系统观感 3~3tjhw;]9  
    ak| VnNa]  
                                                                    
    T!y 9v5  
    W3>9GY90R  
    $6*Yh-"g  
    发射&损耗激光 \a|~#N3?  
    w5PscEc  
                                                                            
    h~9P3 4m  
    SZ[?2z  
    光在焦点区域中的传播表明,来自损耗激光的光会产生环形光斑,其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争,这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 nM.g8d K  
    |k*bWuXgLs  
                                                                                     l P=I0A-  
    3D STED 轮廓 |36%B7H  
    @M<qz\ [  
                   Wj|W B*B  
                                                        
    3'0vLi  
    注意:由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应,我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 =gJ{75tV3  
    62'9lriQ  
    受激发射损耗效应                                                                           >}~[ew  
    wH@S$WT  
    为了近似饱和损耗的影响,我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓(600nm 直径,25% 边缘)。通过系统传播回探测器平面表明,由于这个过程,光斑变得非常小。 Fs4shrt  
    M_%KhK  
    + <E zv  
    'R-\6;3E>9  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           F::Ki4{jJ  
    juF=ZW%i  
    8g_kZ^<[  
                                                                                     6AY( /N8V  
    文件信息 ,T zlW\?\  
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