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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 LyEM^d]  
    )3W`>7>  
     ]p,sve vo  
                                                                           C26vH#C  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 M MyVm"w  
    %t*_Rtz\o  
    任务说明                                                                           &&(^;+  
    W u4` 3  
     Ek0zFnb[Gx  
    ]u;Ma G=;  
    多重光源                                                                           R`)^eqB  
       D..dGh.MY  
    _$wXHONt  
     ?Cg",k'  
    螺旋相位板                                                                           AFd3_>h  
    =qQH,{]c6  
     {km~,]N  
    6qCRM*V  
    探测器插件                                                                           ^A4bsoW  
    4$j7DJ8dj  
     4G:?U6  
    +<\)b(  
    参数运行 (?9@nS  
    m7GM1[?r  
                                                                                 K>!+5A$6i  
    h($XR+!#  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： av}Giz  
    15o<'4|=Lm  
    Usage of the Parameter Run Document /7s^OkQ  
                                                                                     oWJ0>)  
    非时序建模 q<5AB{Oj?  
    k9V#=,K0  
                                                                               8'niew 5d  
    PRR]DEz  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 l ~b  
    S< TUZ /;  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing 2J>v4EWC  
                                                                                     Cb`2"mpWS  
    总结 – 组件…           +,"O#`sy<  
    Tz PG(f  
                                                                     il=:T\'U9  
    2 Nr*  
    +>w %j&B  
     c.<bz  
    系统观感 +2qCH^80  
    5{`a\;*  
                                                                         h(<2{%j  
    ^]{)gk8P~2  
    dKG2f  
    发射&损耗激光 2r =8&~9z  
    :u ruC  
                                                                                 ['`Vg=O.{  
     D|8Pe{`  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 "\CUHr9k  
    =IIB~h[TB  
                                                                                     lDK<gd  
    3D STED 轮廓 eHIsTL@Fp  
    kuQ+MQHs  
                   Ig.9:v`  
                                                             R9-Ps qmF  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 +|iJQF  
    *# 7 1aZ  
    受激发射损耗效应                                                                           RaX :&PE  
    JvI6+[  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 "QV?C  
    m })EYs1  
    K'DRX85F  
     ~4}'R_  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           U6sPJc<  
    $z":E(oy  
     /W @k:  
                                                                                     Y`tv"v2  
     
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