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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 tELnq#<6  
    WuXRL}!\,  
     Z4sjH1W  
                                                                           !.N=Y;@lY  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 45JLx?rN_  
    4tKf  
    任务说明                                                                           Li$k<AM  
    ZWW}r~d{  
     r{;4(3E2  
    }('QIvq2  
    多重光源                                                                           (G'ddZAJV  
       .v8=zi:7Y  
    ]&BFV%kw  
     ]c+'SJQ  
    螺旋相位板                                                                           ai2}vR  
    ~kFRy{z  
     8\_,Y ji  
    "FD~XSRL  
    探测器插件                                                                           Ps-d#~4U;  
    y[eNM6p  
     YZD]<ptR  
    `buTP?]4.  
    参数运行 c3mlO [(  
    SjU6+|l  
                                                                                 l)bUHh5[  
    I<#kw)W!  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： OQyOv%g5C  
    S)h1e%f, f  
    Usage of the Parameter Run Document ,^T2hY`  
                                                                                     r73Xh"SL  
    非时序建模 \hX^Cn=6  
    fTcRqov  
                                                                               Fv B2y8&W  
    4QDzG~N4)|  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 M?97F!\U  
    :oQaN[3>_  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing bZJiubBRI  
                                                                                     ]e9kf$'  
    总结 – 组件…           3e:y?hpeL  
    b*7i&q'H  
                                                                     <9vkiEo  
    'ZZ/:MvQa  
    PV Q%y  
     W3kilhZ  
    系统观感 8'62[e|=7[  
    ujBADDwOg)  
                                                                         xCD+qP ^  
    +!wc(N[(2  
    N*;/~bt7 P  
    发射&损耗激光 kM@,^`&  
    0&@6NW&Mu  
                                                                                 z'*>Tk8h  
    "tIx$?I  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 wz57.e!Me=  
    VB%xV   
                                                                                     mbK$Wp#  
    3D STED 轮廓 LgYzGlJp  
    UgJHSl  
                   EWi@1PAZK  
                                                             ah.Kb(d:  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 'tj4;+xf^  
    r}w 9?s^rB  
    受激发射损耗效应                                                                           A_+ WY|#M  
    MmB-SR[>P  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 t<=L&:<N  
    V^D#i(5  
    'S\H% -  
     '_%Jw:4k  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           6>Fw,$  
    H+Wd#7l,  
     0ni5:tYy  
                                                                                     l%O-c}X  
     
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