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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 lLJb3[ e.  
    SP*5 W)6  
     Lhc@*_2  
                                                                           {&;b0'!Tf  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 6d.m@T6~  
    Z8#I  
    任务说明                                                                           y,r`8  
    I^wj7cFo5  
     GHlra^  
    zbi  
    多重光源                                                                           'w!gQ#De  
       e7?W VV,  
    C0fA3y72  
     !'gz&3B~h  
    螺旋相位板                                                                           _F*w ,b$8  
    ;`+RSr^8$  
     ,C&>mv xA  
    .J@[v  
    探测器插件                                                                           0!VLPA:  
    5]Ra?rF  
     \|pAn  
    b(yO  
    参数运行 }ri*e2y)  
    qB39\j  
                                                                                 h@~X*yLKh  
    xh6x B|Z  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅：  bSR<d  
    pkU e|V  
    Usage of the Parameter Run Document 4GfLS.Ip  
                                                                                     &`Di cfD  
    非时序建模 aK&+p#4t  
    h.9Lh ;j  
                                                                               F^NR qE  
    pjCWg 4ya  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 CU;nrd"  
    u`'z~N4}  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing RsD`9>6)  
                                                                                     &v-V_.0(H  
    总结 – 组件…           F=om^6G%X5  
    >YBpB,WND  
                                                                     Yq?I>  
    by U\I5  
    _tReZ(Vw  
     5An0D V5  
    系统观感 NslA/"*  
    ; BZM~ '  
                                                                         mCt>s9a)H  
    9sCk\`n  
    ?R]y}6 P$  
    发射&损耗激光 =.X?LWKY  
    ^!<7#kX  
                                                                                 G; [A Q:Iy  
    .lBY"W&{  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 W #L"5pRg  
    P082.:q"  
                                                                                     xN m32~  
    3D STED 轮廓 j?f <hQ  
    [/Z'OV"tU  
                   .G_3blE;  
                                                             ^B5cNEO  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 uK:-g,;  
    (<3lo ZaX  
    受激发射损耗效应                                                                           V0Z7o\-J  
    @6co\.bv  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 '98h<(@]  
    , imvA5  
    L{LU@.;1  
     ~J-|,ZMd  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           tt ]V$V  
    !1'-'Q@f  
     @pG lWw9*  
                                                                                     -t 6R!ZI  
     
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