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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 F<H`8*q9  
    Sj,4=a  
     la!1[VeL  
                                                                           ~x76{.gT  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 7r:nMPX  
    *8pe<:A#p  
    任务说明                                                                            4Ub?*  
    a @yE:HU  
     ?w c3 +?\J  
    l{B< "+8  
    多重光源                                                                           ;+aDjO2(  
       ,.1&Ff)S  
    :y<Cd[/  
     D0,oml  
    螺旋相位板                                                                           }V93~>  
    +c~O0U1  
     kV]%Q3t  
    ~7eUt^SD;  
    探测器插件                                                                           ^5^ zo~^o  
    &</ @0  
     #I*ht0++  
    PLY-,Q&'  
    参数运行 `tUeT[  
    0t/z "  
                                                                                 ?U2g8D nFY  
    iNaC ZC  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： SOi(5]  
    q>Ar.5&M_  
    Usage of the Parameter Run Document $`+~QR!h  
                                                                                     6A{s%v H  
    非时序建模 )H=[NB6J8  
    njx\$,ruN  
                                                                               E l8.D3  
    ^ZViQ$a"h;  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 bvxxE/?Ni  
    EJSgTtp 2  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing ?X5glDZ$  
                                                                                     E&Zx]?~  
    总结 – 组件…           c)P%O  
    5qAE9G!c  
                                                                     1(\I9L&J   
    n4 6PQm%p  
    vp}>#&  
     "Qm~;x2kB  
    系统观感 N*4IxY'vX/  
    9.w3VF_C  
                                                                         VL,?91qwe  
    i?s&\3--Y  
    uu46'aT  
    发射&损耗激光 sp]y!zb"5  
    l8 2uK"M  
                                                                                 UBk 5O&  
    BtBt>r(*  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 [T?6~^m=  
    'rx,f  
                                                                                     5O;oo@A:[  
    3D STED 轮廓 4O,a`:d1$6  
    LYo7?rp  
                   q8yJW-GA   
                                                             WOTu" Yj  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 $TW+LWb   
    hI#M {cz  
    受激发射损耗效应                                                                           \kRJUX! s  
    KKTfxNxJn  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 ]R.Vq\A%S  
    ) o(F*v  
    3ncvM>~g  
     v7I*W/  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           JM4`k8mM  
    p:n^c5  
     @V CQ4X7T  
                                                                                     &WV 9%fI  
     
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