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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 ~6kJ~R4  
    b~j~  
     d5:tSO  
                                                                           Q3,=~}ZNK  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 ]% Y\ZIS  
    ".E5t@ }?m  
    任务说明                                                                           [^M|lf   
    2A>C+Y[7\  
     "7d.i(vw  
    SF^x=[ir  
    多重光源                                                                           Y9tV%  
       T/5"}P`  
    C3)|<E  
     q3)wr%!k5D  
    螺旋相位板                                                                           LE K/mCL  
    Af9+HI O  
     "5}%"-#  
    Oqmg;\pm  
    探测器插件                                                                           a.DX%C /5  
    f^?uY8<  
     um[!|g/  
    (]XbPW  
    参数运行 +zsZNJ(U  
    xs%LRF# u  
                                                                                 cOb4c*  
    @!<d0_dnC  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： -\Z `z}D  
    &K *X)DAs  
    Usage of the Parameter Run Document %$TEDr!  
                                                                                     'gDe3@ci!  
    非时序建模 jo_ sAb  
    @rwU 1T33  
                                                                               ax_YKJ5#P  
    *b"CPg/\  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 7~b!4x|Z  
    "OL~ul5  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing x2k*| =$  
                                                                                     ^i'y6J  
    总结 – 组件…           8QF2^*RZ7z  
    .oR3Q/|k]  
                                                                     etyCrQ ?U  
    >zmzK{A=  
    #*2Rp8n  
     $"8d:N?I[  
    系统观感 DMd ,8W7a  
    =IHje;s  
                                                                         ?4G(N=/&  
    ,[`$JNc  
    <'&F;5F3V  
    发射&损耗激光 //.>>-~1m  
    #mLuU  
                                                                                 ooE{V*Ie  
    3taa^e.  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 F P@qh  
    QaQ'OrP  
                                                                                     OVR?*"N_  
    3D STED 轮廓 5/M ED}9C(  
    T'1gy}  
                   l}}UFEA^  
                                                             GaBTj_3  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 A-wRah.M  
    tZA:  
    受激发射损耗效应                                                                           )~ z Z'^  
    V=}1[^  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 i:Y\`J  
    zOGR+Gq_Z  
    >"("*3AO  
     jG D%r~lN  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           6OB",  
    fbC~WV#  
     q*8lnk  
                                                                                     f=aIXhiYU  
     
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