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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 *(T:,PY  
    QvKh,rBFVG  
     v : OR   
                                                                           4J/}]Dr5  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 0i\M,TNf*  
    E vg_q>  
    任务说明                                                                           8&qZ0GLaT  
    ]Hefm?9*^  
     0?:} P  
    gL *>[@RO  
    多重光源                                                                           ]\hSI){  
       %1xb,g KO  
    ]rH\`0  
     _C*fs< #  
    螺旋相位板                                                                           /)}q Xx&  
    I%j|D#qY:T  
     jN;@=COi  
    qh|_W(`y  
    探测器插件                                                                           bU2Z[sn.  
    ?R$F)g7<  
     Vr`R>S,-  
    WrxP  
    参数运行 8"2=U6*C  
    >_-s8t=|  
                                                                                 W14 J],{L  
    8hOk{xs8  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： 6;\I))"[  
    j<V Fn~*_  
    Usage of the Parameter Run Document m.# VYN`+A  
                                                                                     ao1(]64X"  
    非时序建模 F;4vPbH+  
    Z<1FSk,[  
                                                                               (2J: #  
    Lsq A**=  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 "d#Y}@*~o  
    /Y W>*?"N  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing WM7oM~&{6  
                                                                                     y&q*maa[  
    总结 – 组件…           \o}xF@sM5  
    qT{U(  
                                                                     ;4R$g5-4X  
    y~ AVei&  
    ,<n}W+3  
     A!s`[2 Z  
    系统观感 8Wrh]egu1  
    (6?9BlH~  
                                                                         .zA^)qgL  
    BgurzS4-  
     8n#HFJ~  
    发射&损耗激光 [YRz*5   
    [w>$QR  
                                                                                 3m]4=  
    1->dMm}G[  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 iEVb"w0 59  
    /[a~3^Gs^  
                                                                                     %+ @O#P  
    3D STED 轮廓 9Tg IB  
    N=4G=0 `ke  
                   v~f HYa>  
                                                             nF54tR[  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 [>+4^&  
    ' KWyx  
    受激发射损耗效应                                                                           Od)Uv1  
    <6EeD5{*  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 6_J$UBT  
    #ZJ _T`l  
    6.CbAi3Z  
     j| v%)A  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           \a5U8shc  
    w,.+IV$Kk  
     HKU~UTRnZ  
                                                                                     NO~*T?&  
     
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