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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 k:i4=5^*GX  
    ]2A^1Del  
     B^=-Z8  
                                                                           {L971W_L  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 qw301]y  
    =>S]q71  
    任务说明                                                                           b1q"!+8y  
    Q>qUk@  
     >tS'Q`R  
    W ~<^L\Lu  
    多重光源                                                                           $GV7o{"&  
       zC:ASt  
    %fZJRu 1b  
     Y>z>11yEB0  
    螺旋相位板                                                                           BU)U/A8iS  
    D>r&}6<  
     Z3e| UAif  
    Rr$-tYy6  
    探测器插件                                                                           nbp=PzZy  
    a~`eQ_N D  
     R+:yVi[F]U  
    hR n<em  
    参数运行 m,28u3@r  
    1#g2A0U,  
                                                                                 L< S9  
    \&:nFb%=  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： %QH$ipM  
    3yme1Mb  
    Usage of the Parameter Run Document $p8xEcQdU#  
                                                                                     ;a!S!% .h  
    非时序建模 udH7}K v  
    h^45,E C  
                                                                               GMx&y2. Z  
    ldcqe$7,  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 iU918!!N   
    H'5)UX@LP  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing ?,Xw[pR  
                                                                                     %Xd[(Q)  
    总结 – 组件…           k}CVQ@nd  
    "^[ 'y7i  
                                                                     9=M$AB  
    Q}JOU  
    I|!OY`ko  
     c ]-<vkpV  
    系统观感 5I;&mW`1,`  
    2nObl'ec  
                                                                         Paq4  
    @;4zrzQi7  
    nPtuTySG  
    发射&损耗激光 qZh/IW  
    uZYF(Yu  
                                                                                 B@))8.h]  
    I,DS@SK  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 Dpac^ST  
    lFj]4  
                                                                                     ,THw"bm  
    3D STED 轮廓 #z%fx   
    'oVx#w^mf  
                   )q4[zv9  
                                                             hfB%`x#akQ  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 *>}@7}f  
    `(;m?<%  
    受激发射损耗效应                                                                           V Q@   
    =XQ%t @z0  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 DCa^ u'f  
    lVa%$F{Pq  
    +`0k Fbx  
     _LnpnL:  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           ; 2#y7!  
    (9 d&  
     FV!q!D  
                                                                                     qR{=pR  
     
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