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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 PgHe;^?j  
    ~j3O0s<gK  
     rZ`+g7&^Fh  
                                                                           lgrD~Y (x  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 x9\z^GU%H  
    BPO)<bx_  
    任务说明                                                                           V9`?s0nn^  
    [~_)]"pU  
     BV;dV6`z  
    Z:eB9R#2y  
    多重光源                                                                           /vgEDw  
       b:B+x6M  
    oD<aWZ"Z  
     YOOcHo.F  
    螺旋相位板                                                                           ;Qn)~b~  
    m4\e `nl  
     BN7]u5\7  
    & 6="r}  
    探测器插件                                                                           0nr5(4h  
    J(>T&G;  
     aFw \ w>*^  
    2 o)8'Lp  
    参数运行 ==#mlpi`S[  
    -XASS%  
                                                                                 /aV;EkyO,  
    ~#MXhhqB  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： wE~&Y? ^  
    M:M"7>:  
    Usage of the Parameter Run Document m+|yk.md  
                                                                                     GBYeiEgZh  
    非时序建模 Kj53"eW  
    )WNw0cV}J>  
                                                                               q!;u4J  
    D?.H|%  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 t1`.M$  
    "%I<yUP]U  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing @ / .w%  
                                                                                     w%1-_;.aU6  
    总结 – 组件…           O\J{4EB@.  
    N?EeT}m_  
                                                                     sEymwpm9  
    6%^A6U  
    <EKTFHJ!  
     1SF8D`3  
    系统观感 +R8G*2  
    z[Ah9tM%  
                                                                         A('o &H  
    70<{tjyc  
    %63s(ekU  
    发射&损耗激光 tdsfCvF= a  
    'pnOHT  
                                                                                 + mPVI  
    ~2;\)/E\  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 ;&dMtYb  
    6$)FQ U  
                                                                                     "c.@4#/_  
    3D STED 轮廓 ~KQiNkA\|l  
    vRh)o1u)  
                   cJE4uL<  
                                                             3a?|}zr4  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 ]f~!Qk!I7r  
    )DGJr/)  
    受激发射损耗效应                                                                           L1#_  
    1'!D   
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 d@%PTSX  
    cT5BBR   
    NTo[di\_  
     !k Heslvi  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           Hqtv`3g  
    |~o0 -: 'C  
     <naxpflom0  
                                                                                     fg7  
    文件信息 sd%m{P2  
    @'A0Lq+#  
    ?AO22N|j  
     nAC>']K4$  
    进一步阅读 iR"6VO  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     nDS\2  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy &hUEOif  
    9k~%HN-[  
    市场图片 JEs@ky?{z  
    ^(s(4|  
     } eF r,bJ  
     
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