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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 06-25
    摘要 qR?}i,_  
    ; 2V$`k  
     *f>\X[wN  
                                                                           WDV=]D/OE  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 |r)QkxdU,  
    pBv,,d`  
    任务说明                                                                           T9]0/>  
    afD {w*[8  
     34k>O  
    (pP.*`JRv  
    多重光源                                                                           K[/L!.Ag  
       U@n5:d=  
    K `<HZK  
     ]SPuNBsy)  
    螺旋相位板                                                                           f/IQ2yT-:D  
    +Ig%h[1a  
     N'aq4okoL  
    .7LQ l ?  
    探测器插件                                                                           [UC_  
    W+U0Y,N6  
     pYr+n9)^  
    PE/uB,Wl  
    参数运行 d8+@K&z|  
    J=: \b  
                                                                                 bqA`oRb\  
    2]5Li/   
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： +S-60EN*A  
    =&9c5"V&  
    Usage of the Parameter Run Document enQW;N1_M  
                                                                                     =_m3 ~=Z  
    非时序建模 4e AMb  
    WvfM.D!  
                                                                               Qo^(r$BD  
    mD&I6F[s  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 S^p^) fAmF  
    8Lx1XbwK  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing 3"v>y]$U  
                                                                                     S^==$TT  
    总结 – 组件…           w{k^O7~  
    y06**f)  
                                                                     f_xvXf:  
    Umzb  
    aBG^Xhx  
     w%X@os}E  
    系统观感 OgC,oj,!/  
    X/vyb^:U  
                                                                         @|wU @by{  
    kN{$-v=K  
    |mHf 7gCX  
    发射&损耗激光 w $-q&  
    G `!A#As  
                                                                                 p'%S{v@5((  
    U.I w/T-5  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 u7RlxA:  
    X;UEq]kcmn  
                                                                                     ~"J1 @<  
    3D STED 轮廓 'xG J;pY  
    D|m3. si  
                   GQhy4ji'z  
                                                             gt(p%~  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 s2|.LmC3|B  
    =7H\llL4BC  
    受激发射损耗效应                                                                           kV T |(Y  
    dhnX\/  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 39 zfbxX  
    6B7*|R>  
    "!AtS  
     )`'a1y|  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           G6W|l2P!  
    $':5uU1}  
     4u%AZ<-C}m  
                                                                                     ")vtS}Ekt  
    文件信息 Bt,'g* Cs  
    qpCaW0]7  
    a)=|{QR>W  
     m;{HlDez  
    进一步阅读 :A @f[Y'9  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     N wNxO  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy #5{xWMp/0  
    *n&Sd~Mg  
    市场图片 zx2`0%Q  
    Jj=N+,km  
     .xmB8 R  
     
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