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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 06-25
    摘要 {-E{.7  
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    i$F)h<OU+  
                                                                      
    "TxXrt%>A  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术,以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中,两束激光—一束正常,一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应,与通常的显微镜技术(例如,宽视场显微镜)相比,后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中,介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应,在焦点区域采用等效孔径。 AI)9E=D%  
    eIEcj<f  
    任务说明                                                                           zMG4oRPP  
    w?/,LV  
    \Js9U|lY  
    # I<G:)  
    多重光源                                                                           Zkz:h7GUG-  
       HD`%Ma Yhc  
    \l[5U3{  
    :*8@Mj Z4  
    螺旋相位板                                                                           `hfwZ*s  
    "RG.vo7b  
    Te.hXCFD  
    xA-G&oC]<T  
    探测器插件                                                                           d_yqmx?w  
    O+e8}Tmm  
    0p#36czqy  
    4dy)g)wM  
    参数运行 MKH7d/x  
    %] Bb;0G  
                                                                            
    bVVa5? HP  
    *$s)p>  
    为了实现焦点区域的z-扫描,可以执行参数运行。使用此工具,用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息,请参阅: &zm5s*yNt  
    +FJ o!~1  
    Usage of the Parameter Run Document g\^(>Ouc  
                                                                                     C :e 'wmA  
    非时序建模 9~4Kbmr>q  
    z1L.  
                                                                          
    2AlLcfAW  
    xqG` _S l  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后,用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时,将对活动光路进行初步分析(通过所谓的Light Path Finder)。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 \q,w)BE  
    P EbB0GL  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing qD9B[s8  
                                                                                     B8P%4@T  
    总结 – 组件…           zL_X?UmV  
    wF&\@H  
                                                                
    aN7u j  
    In 1.R$O  
    $4L=Dg  
    S-L6KA{  
    系统观感 $]hf2Yr(  
    ZHB'^#b  
                                                                    
    2/bck)p=  
    bLUn0)c  
    }%:?s6Ler  
    发射&损耗激光 u}$U|Cw-;T  
    > Euput\  
                                                                            
    tG{Vn+~/  
    G3e%~  
    光在焦点区域中的传播表明,来自损耗激光的光会产生环形光斑,其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争,这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 /wK7l-S  
    V*/))n?  
                                                                                     Mc\lzq8\ 1  
    3D STED 轮廓 JlH|=nIaj6  
    X~R qv5@-  
                   E O}(MXS  
                                                        
    &"CS1P|  
    注意:由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应,我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 PzF)Vg  
    $4?%Z>'  
    受激发射损耗效应                                                                           ;1y\!f3#V~  
    q`{.2yV  
    为了近似饱和损耗的影响,我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓(600nm 直径,25% 边缘)。通过系统传播回探测器平面表明,由于这个过程,光斑变得非常小。 )XNcy"   
    $iB(N ZV  
    c1z5t]d   
    Q/+a{m0 f  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           (+ >n/I6  
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     d,H%  
                                                                                     jrW7AT)\  
    文件信息 %?cPqRHJ ~  
    bb<Vh2b>R  
    g)"6|Z?D"  
    Psv-y  
    进一步阅读 Z uE 0'9  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF
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    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy Vs"M Cqi  
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