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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 06-25
    摘要 QD^"cPC)mM  
    J Sms \  
     GI/4<J\  
                                                                           }J] P`v  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 ]*\<k  
    :snn-e0l  
    任务说明                                                                           UpqDGd7M  
    y0 qq7Dmu  
     y5:al7*P  
    n$jf($*  
    多重光源                                                                           33w(Pw  
       MKr:a]-'f~  
    5U.,iQ(d  
     1~9AQ[]w8  
    螺旋相位板                                                                           l( ?Yx  
    @-BgPDi.Z  
     "dBCS  
    AK5$>Pkvk  
    探测器插件                                                                           9p9-tJfH.  
    ATf{;S}  
     Q)Zk UmW  
    x^JjoI2vf  
    参数运行 'W|@d8}h  
    21G:!t4/?n  
                                                                                 !d=Q@oy5  
    K7 $Vl"l  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： eO=!(  
    .@;,'Xw1~  
    Usage of the Parameter Run Document -g)*v<Fb5  
                                                                                     vh6#Bc)i%w  
    非时序建模 T#w *5Qf  
    ?u8 vK<2h  
                                                                               8v']>5S]#  
    U-3uT&m*9.  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 sYY=MD  
    [8C6%n{W  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing [EV}P&U  
                                                                                     S~4HFNe^&  
    总结 – 组件…           #L,5;R{`  
    -Fs^^={Q  
                                                                     Y/w) VV  
    h\^> s$  
    7c Gq.U  
     yy-\$<j  
    系统观感 Rd.[8#7VE  
    )SYZ*=ezl.  
                                                                         O@bDMg  
    q7% eLJ  
    ZW|VAn'>  
    发射&损耗激光 "Z6:d"S`  
    >}ozEX6c2  
                                                                                 c~UYs\  
    -/ #tQ~{gs  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 tr\Vr;zd  
    3fJwj}wL  
                                                                                     c/57_fOK  
    3D STED 轮廓 zorTZ #5  
    E0*'AZi&  
                   ^ok;<fJ  
                                                             o s HE4x  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 p }bTI5  
    S Yvifgp  
    受激发射损耗效应                                                                           *ad"3>  
    :1wMGk  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 B1A5b=6G<  
    HSOdqjR*  
    @kKmkVhu*  
     @.X}S "yr  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           PaFJw5f  
    1XO*yZF  
     ?%h JZm;  
                                                                                     |8"~ou:.  
    文件信息 Y2Y2>^  
    0ZV)Y<DJ  
    Zh.fv-Ecp  
     l%A~3  
    进一步阅读 sy` : wp  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     OI.2CF  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy <8 At =U  
    p\8cl/~  
    市场图片 V|.aud=7z  
     v|Tg %  
     rQ'tab.,]  
     
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