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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 06-25
    摘要 .N_0rPO,Kw  
    "!E(= W?  
     u$t*jw\fHg  
                                                                           `q7I;w+g  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 Z>o;Yf[  
    TjD`< k  
    任务说明                                                                           ~K:#a$!%,  
    =c-j4xna>  
     %L/Wc,My  
    pSE"] N  
    多重光源                                                                           n3isLNvIp  
       <%>Q$b5  
    .}SW`R Pk  
     s,K @t_J  
    螺旋相位板                                                                           \ts:'  
    /  DeI s  
     d";+8S  
    ghbxRnU}  
    探测器插件                                                                           #OJ^[Zi<  
    +Y)rv6}m  
     LNXhzW   
    vB/MnEKR  
    参数运行 KSh<_`j  
    >I]t |RT])  
                                                                                 jl3RE|M\<  
    4xtbP\=   
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： }`f%"Z  
    g3LAi#m  
    Usage of the Parameter Run Document #jA|04w  
                                                                                     ],qG!,V  
    非时序建模 1k{ E7eL  
    bi#o1jR  
                                                                               l:j9lBS  
    hd/5*C{s  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。  yZmQBh$  
    !x;T2l  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing  PovPO  
                                                                                     Z%(aBz7Et  
    总结 – 组件…           z)43+8;  
    A-ir   
                                                                     e3) rF5pp  
    r A0[y  
    9zi/z_G  
     r'{pTgm#  
    系统观感 y'2K7\>E  
    $qg5m,1?  
                                                                         1ww|km  
    ]~3wq[O  
    5T8X2fS:  
    发射&损耗激光 @_1$ <8  
    si3i#l&.b_  
                                                                                 WAqR70{KM  
    LeQ2,/7l:  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 c)iQ3_&=  
    7lR(6ka&/  
                                                                                     8{%/!ylJz  
    3D STED 轮廓 |I)xK@7  
    Tk.MtIs)V}  
                   *v l_3S5_  
                                                             `!!A;G7Qg  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 =Q3Go8b4HJ  
    cCyg&% zsT  
    受激发射损耗效应                                                                           +vDT^|2SF  
    #\%Gr tM  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 &[R&@l Y  
    1PLKcU  
    hLx*$Z>  
     {\C$Bz  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           kJJQcjAP:  
    JXUO?9  
     -7m;rD4J  
                                                                                     -}4H'%Z(i  
    文件信息 7dV^35 KP  
    rd%3eR?V  
    cX *  
     PCt&66F   
    进一步阅读 P,I3E?! j  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     3,N7Nfe  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy V&h ,v%$  
    Axj<e!{D  
    市场图片 n$#^gzU4  
    //H+S q66  
     MW'z*r|,  
     
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