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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 aLO^>",  
    b9.M'P\  
     CKsVs.:u  
                                                                           Rr )+M3'  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 4U}qrN~=  
    P?54"$b  
    任务说明                                                                           EYAaK^ &  
    7},A. q  
     &.?XntI9O  
    G95,J/w  
    多重光源                                                                           Gz[yD ~6a  
       J$dwy$n  
    CD|[PkjW  
     sibYJKOy  
    螺旋相位板                                                                           g)D_  !iz  
    .HqFdsm  
     1yy?1&88S  
    ).k DY ?s  
    探测器插件                                                                           *b~6 BM$  
    'rQ"Dc1D  
     Vz{+3vfra6  
     4M'>oa  
    参数运行 Tkbao D  
     {_rfhz  
                                                                                 @ZKf3,J0  
    yU?jmJ  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： o5<<vvdA  
    VJh8`PVX  
    Usage of the Parameter Run Document my=f}%k=  
                                                                                     bS.w<V Ew  
    非时序建模 Xlo7enzY  
    pl[J!d.c  
                                                                               >ZA=9v  
    v* ;d  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 q2GW3t  
    #el27"QP0  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing <N<Q9}`V  
                                                                                     6|TSH$w_  
    总结 – 组件…           %|Ps|iV  
    R[WiW RfD  
                                                                     |(7}0]BP0  
    L9x-90'q,  
    / )0hsQs  
     p!.~hw9  
    系统观感 "4j~2{{ F  
    V+d_1] l  
                                                                         @hLkU4S  
    8h )XULs2  
    R>' %}|v/  
    发射&损耗激光 8hRcB[F~S  
    UHBXq;?&q  
                                                                                 I[Ra0Q>([k  
    MNT~[Z9L5G  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 [P$Xr6#  
    oy+|:[v:Fk  
                                                                                     3"fDFR  
    3D STED 轮廓 sXKkZ+2q  
    ul{x|R  
                   j;x()iZ<  
                                                             _ _Of0<  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。  7WJ \nK  
    {@Wv@H+4  
    受激发射损耗效应                                                                           > A#5` $i  
    tjdPi a  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 'H1~Zhv  
    \j8vf0c5b  
    O&%'j  
     =C\Tl-$\f  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           =bKDD <(  
    bQ< qdGa  
     a[{$4JpK  
                                                                                     XqH@3Ehk  
    文件信息 V&mkS  
    -H| 9 82=  
    Pwh}hG1s a  
     rYUIFPN  
    进一步阅读 y:G%p3h)[  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     0Tj,TF  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy GT{4L]C  
    R >xd*A  
    市场图片 Z)!8a$M~  
    |r9<aVlK  
     %9-^,og  
     
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