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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 8rJf2zL  
    ?gAwMP(>  
     bly `m p8#  
                                                                            fZap\  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 $&, KZ>  
    ErA*a3  
    任务说明                                                                           |jH Yf42Q  
    fi'zk  
     X pK eN2=p  
    u9q#L.Ij  
    多重光源                                                                           w=nS*Qy 2  
       AVz907h8  
    HYdt3GtJ?  
     6L~5qbQ  
    螺旋相位板                                                                           LkF*$  
    T|$tQgY^  
     NU.4_cixb  
    u1'l4VgT  
    探测器插件                                                                           u&`rK7 J  
    jv29,46K  
     /55 3v;l<  
    YuO!Y9iEm  
    参数运行 W>CG;x{  
    A] 'XC"lS  
                                                                                 6~!7?FK  
    ^8ilUu  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： yJ; ;&  
    T-s[na(/L  
    Usage of the Parameter Run Document Qdc#v\B  
                                                                                     oO &%&;[/A  
    非时序建模 !8 l &%  
    nH?#_ 5F1  
                                                                               N#Nc{WU 'B  
     GVu-<R  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 h=au`o&CG  
    C?g*c  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing L?(1 [jB4G  
                                                                                     LmROG-9  
    总结 – 组件…           >Zm|R|{BE  
    8"wavh|g4  
                                                                     IQ~EL';<w  
    ?[5_/0L,=  
    YpSK |(  
     nl-tJ.MU"  
    系统观感 pug;1UZ  
    .'1]2/ad  
                                                                         uF*tlaV6  
    'A/{7*,  
    m0Uk*~Gz  
    发射&损耗激光 lz#@_F|.*  
    51s3hX$  
                                                                                 LwI4 2  
    h&Q-QU  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 b]Lp_t  
    SzjylUYV  
                                                                                     gln X C  
    3D STED 轮廓 C !Lu`y  
    59_VC('  
                   j4D`Xq2 X  
                                                             g3'yqIjQL  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 w4uY/!~k  
    y[f6J3/  
    受激发射损耗效应                                                                           2ZMVYa2%(  
    Uv:NY1(3!  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 5[+E?4,&  
    d6e]aO=g  
    Bp=BRl  
     sGbk4g  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           BMbZ34^e  
    <;E>1*K}8  
     Wl>$<D4mO[  
                                                                                     z 2Ao6*%  
    文件信息 % ELf 7~  
    4g/Ly8  
    -~=:tn)0  
     }/-TT0*6j<  
    进一步阅读 9D& 22hL4  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     c6F8z75U  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy v<S?"# ]F=  
    ].*I Z  
    市场图片 BIEeHN4  
    @1peJJ{  
     x4S0C[k  
     
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