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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 \g]rOYW  
    N>L)2WKFT  
    K7x;/O  
                                                                      
     nmL|v  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术,以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中,两束激光—一束正常,一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应,与通常的显微镜技术(例如,宽视场显微镜)相比,后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中,介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应,在焦点区域采用等效孔径。 7dB_q}<  
    jl;N Fk%  
    任务说明                                                                           uUBUUr  
    ;gaTSYVe  
    ]EN&EA"<  
    -H\j-k  
    多重光源                                                                           "7(@I^'t6  
       v8uUv%Hkd  
    &2y9J2aA  
    'Q7t5v@FF  
    螺旋相位板                                                                           *mn9CVZ(}M  
    .,thdqOO  
    rmX5-k  
    g-x;a0MQx  
    探测器插件                                                                           +=L+35M  
    #"C* dNAB  
    jtpk5 fJB  
    | Cfo(]>G  
    参数运行 1G(wESe  
    Q[`2? j?  
                                                                            
    dj,lbUL  
    h52+f  
    为了实现焦点区域的z-扫描,可以执行参数运行。使用此工具,用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息,请参阅: 1-4[w *u>  
    JqN$B\J,  
    Usage of the Parameter Run Document LBpAR|  
                                                                                     g*9&3ov  
    非时序建模 @[/!e`]+  
    O9N%dir  
                                                                          
    Xn!=/<TIVz  
    DAN"&&  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后,用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时,将对活动光路进行初步分析(通过所谓的Light Path Finder)。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 @6U&7!  
    da8 R.1o  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing {qry2ZT5  
                                                                                     h^ K>(x  
    总结 – 组件…           A}"uEk(R  
    ?K.!^G  
                                                                
    uxq#q1  
    K^I$05idi  
    G0r(xP?  
    iIo>]\Pw  
    系统观感 6|Rj YX  
    iVqF]2 >  
                                                                    
    }u5J<*:bZ  
    R,zp&L  
    P}PMRAek  
    发射&损耗激光 H/G;hk  
    5'0kf7  
                                                                            
    A_6Dol=J@  
    @ 6b;sv1W  
    光在焦点区域中的传播表明,来自损耗激光的光会产生环形光斑,其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争,这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 8,m:  
    4vH.B)S-  
                                                                                     } 4>#s$.2  
    3D STED 轮廓 Pb :6nH=  
    G~4|]^`g  
                   lo >:S1  
                                                        
    MD+ eLA7  
    注意:由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应,我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 Rk{2ZUeg  
    /z(s1G.  
    受激发射损耗效应                                                                           3'`X_C|d53  
    <DdzDbgax  
    为了近似饱和损耗的影响,我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓(600nm 直径,25% 边缘)。通过系统传播回探测器平面表明,由于这个过程,光斑变得非常小。 E~Y%x/oX  
    h"N#/zQ  
    dnX^?  
    gm&O-N"= U  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           t`4o&vsj=  
    ]"1\z>Hg  
    ]0p*EB=C*  
                                                                                     ~HgN'#Y?  
    文件信息 R2[ }  
    tbi(e49S  
    SYK?5_804  
    RQ51xTOL4]  
    进一步阅读 -IS?8\ Q<  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF
    S>?B)  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy 7m 9T'  
    =0mGfT c  
    市场图片 Jc9^Hyqu&  
    >z8y L+  
    !]WC~#|{B  
     
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