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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 06-25
    摘要 I."p  
    d "<F!?8  
     QTJu7^ O9  
                                                                           >.%4~\U  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 pa/9F[  
    vs9?+3  
    任务说明                                                                           UZxmh sv  
    r|Zi3+  
     n Y w\'c  
    m#@_8_ M  
    多重光源                                                                           RXSf,O  
       2W$lQ;iO  
    q?  z>  
     s;.=5wcvi?  
    螺旋相位板                                                                           '1+.t$"/tU  
    nB@UKX  
     !k&)EWP?  
    F'W> 8  
    探测器插件                                                                           oK+Lzb\d{M  
    TUTe9;)  
     [#b2%G1  
     &"S/Lt  
    参数运行 3VO:+mT  
    <0j{ $.  
                                                                                 F? ]N8W  
    7sV /_3H+  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： x mo&![P  
    BQrL7y  
    Usage of the Parameter Run Document 9YKDguG  
                                                                                     zB)%lb  
    非时序建模 vDDljQXw4  
    7 `Du5>b8  
                                                                               R } %8s*  
    0D3OE.$0  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 K8Zt:yP  
    r_o<SH  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing 0s%6n5>  
                                                                                     4XG]z_+I  
    总结 – 组件…           Q"}s>]k3_  
    WYO\'W  
                                                                     2VYvO=KA  
    /$`;r2LG  
    c E76L%O  
     )Vk:YL++  
    系统观感 |5ONFd e"0  
    E+{5-[Zc*$  
                                                                         ,)$Wm-  
    ~3 @*7B5Q  
    y4<+-  
    发射&损耗激光 a<p %hY3  
    ,+-h7^{`  
                                                                                 Bz:0L1@,4a  
    ~e^)q>Lb7(  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 lU$X4JBzS  
    /0\QL+^!  
                                                                                     BE4\U_]a3  
    3D STED 轮廓 rw*M&qg!z  
    Czh8zB+r  
                   G"Pj6QUva  
                                                             e6m1NH4,  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 lC{L6&T  
    ~XQ$aRl&  
    受激发射损耗效应                                                                           IUawdB5CB  
    qw0~ *0}  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 Zd XKI{b  
    1 ypjyu  
    gMay  
     #M:B3C!ouY  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           RAOKZ~`  
    iiN?\OO^~  
     gvr]]}h:O  
                                                                                     c}cG<F  
    文件信息 T#N80BH[  
    .b~OMTHuvM  
    B$`d&7I;D  
     !PI0oh  
    进一步阅读 [oJ& J>U'  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     ?\d5;%YSr  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy d~/xGB`<  
    d'q&Lq  
    市场图片 'A1E^rl]=  
    w3d\0ub  
     At|h t  
     
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