由上面的3个条件之前的因素不只这里提到的这些 dXe763~<
需要追加: Z'S>i*Ts
7.Z轴位置不只不固定,被采集过程还有可能是一半在区域内一半在区域外的 -|J?-
8.被照明目标存在侧向散射,而其侧向散射是可能影响相临细胞的 9^igzRn0
9.其实细胞的发光不是4PI空间的均匀分布. dam.D.o"
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他们确实会得到原来的3个技术要点但却有所不同 ],H%u2GE_
1.分辨率一致; /PPk
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2.区域是否200UM,首先要根据荧光显微镜观察: A运动细胞统计间距,B运行速度,C排列方向(重点是同细胞每次开启关闭流动之后排列方式变化) lDMYDy{<
区域内无差别采集一致 ?Z1pPd@
3.效率及灵敏度不是可用,是必须可用灵敏度的至少2倍以上(前提是假设细胞统计最小中心距>2倍细胞大小,如果2的显微镜观测并非如此,灵敏倍率还要变化)..(原因是为了采集到准确数据,每个细胞等效时间需要拍照2次,从而去除非全细胞的失误数据) *'d5~dz=
而3的方式不是绝对的,还有一种采集方式是累积暴光最后分析,这种需要的灵敏度偏低,可以多次叠加暴光收集统计数据... 9nM {x?
当然无论采用哪种,样品阶段都要以兼容为目的,连拍单细胞采集和累积暴光都可以做测试才行(已有机器抄袭例外,这里只讨论没有人做过此产品的情况下该如何进行) .IF dJ
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