非线性焦点调制显微方法实现快速低光强超分辨成像
从频域角度考虑光学显微成像,通过在传统共聚焦点扫描显微成像系统中加入相位调制元件,利用饱和光束照明下的非线性效应,获取了成像样品的更多细节信息,实现了低光强下(毫瓦级别)60 nm分辨率的超分辨成像。
目前,该技术在荧光纳米颗粒、细节大小为80~100 nm的细胞核孔、细节大小为数十纳米的波形蛋白和细胞微管等多类亚波长样品上均得到验证,显示了其普适性强、使用方便的优点。图3所示为使用共聚焦方法与NFOMM方法观察细胞微管和波形蛋白双色样品的对比效果图,可以看出NFOMM方法明显提高了分辨率。NFOMM的简便、低成本以及与普通共聚焦系统的高度兼容性使其在生物医学和材料学等重要领域具有广阔的应用前景。该课题组期待NFOMM 能作为附件,对于现有广泛应用的共聚焦系统进行换代升级,在低成本下实现快速超分辨显微成像。同时NFOMM的计算成像思路,也为下一代超分辨光学显微镜提供了新的设计理念。 ![]() 图3.共聚焦方法与NFOMM方法观察细胞微管和波形蛋白双色样品的对比实验效果图 此项成果近期以Nonlinear focal modulation microscopy为题发表在Physical Review Letters [120, 193901 (2018)] 上并当选为2018年第19期封面文章。论文第一作者为浙江大学赵光远和郑程硕士,通讯作者为浙江大学匡翠方和刘旭教授。合作单位包括香港中文大学和美国伊利诺伊大学厄巴纳-香槟分校。此工作得到了973项目、国家自然科学基金委重大仪器等项目的资助。
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