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2025-06-25 08:05 |
受激发射损耗(STED)显微镜原理
摘要 a-O9[?G/x F!.@1Fi1
ydBoZ3 } P 0,]Ud 受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术,以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中,两束激光—一束正常,一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应,与通常的显微镜技术(例如,宽视场显微镜)相比,后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中,介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应,在焦点区域采用等效孔径。 "WK.sBFz4 DGp'Xx_8 任务说明 ZLBfQ+pM) A4'vJk
3``$yWWg `yc.A%5 多重光源 `
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!a?o9<V oz@yF)/Sm 螺旋相位板 m3.d!~U\ T|oz_c\e
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@{~x:P5g u},<On 参数运行 b)
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44wY5nYNt >b<br 为了实现焦点区域的z-扫描,可以执行参数运行。使用此工具,用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息,请参阅: G4ZeO:r bCc^)o/w Usage of the Parameter Run Document e,8C}
2 HQTB4_K\ 非时序建模 i7*4hYY AY|8wf,LS
YAd.i@^ hm?-QVRPV 将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后,用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时,将对活动光路进行初步分析(通过所谓的Light Path Finder)。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 ~9 K4]5K- b Kv9F@ Channel Setting for Non-Sequential Tracing M="%NxuS Mx[tE?!2 总结 – 组件… BL,YJM(y 8h-6;x^^
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dIMs{! aY8>#t? 系统观感 l$MX\ T3!l{vG
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_^dWJ0 efRa|7!HK 发射&损耗激光 I)9;4lix zgqe@;{
e-\J!E'1F 980[]&( 光在焦点区域中的传播表明,来自损耗激光的光会产生环形光斑,其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争,这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 ka*VQXk* X~%Wg*Hm r'k-*I 3D STED 轮廓 E #8 `X 's!EAqCN
pOGVD NCl$vc;, 注意:由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应,我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 !f]F'h8 js'*:*7 受激发射损耗效应 (m~MyT#S ] E`J5o}op 为了近似饱和损耗的影响,我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓(600nm 直径,25% 边缘)。通过系统传播回探测器平面表明,由于这个过程,光斑变得非常小。 x^9W< F(}d|z@@
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Vad(PS0 -9vAY+s. 文件信息 {Km|SG[-q `L7 cS
XOVZ'V a{el1_DIGK 进一步阅读 rh/3N8[6 • Simulation of Multiple Light Source in VLF $l-j(=Md • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy b]Oc6zR,,~ 4- N># 市场图片 5{[3I|m{ Vr`UF0_3q
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