受激发射损耗(STED)显微镜原理

-R'p^cMA   摘要 M{kPEl&Z   YY!(/<VI   |V9%@ Y?                                                                      ;(0:6P8I   受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 &`L5UX   *gz{:}NX   任务说明                                                                           vB4cdW 2#3   pjj 5   0acY@_    ^RWt   多重光源                                                                           %yw*!A1      uWnS<O   CJKH"'u3^   j|G-9E   螺旋相位板                                                                           f!$J_dz   nnGA_7-t   8v^i%Gg   qk,cp},2K   探测器插件                                                                           ,Vs:Lle   A[ iPs9   |C&eH$?~=R   aY:(0en]&   参数运行 jATU b-   ?ha}&##                                                                            omjLQp[%   E7eVg*Cvi   为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： d}o1 j   5N/]/   Usage of the Parameter Run Document a+~o: 5                                                                                    ?^ErrlI_   非时序建模 \7j)^   qBNiuV;*                                                                          ,xh9,EpBk   /3TorB~Y   将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 nIi_4=Z   'j)eqoj   Channel Setting for Non-Sequential Tracing 4a @iR2e                                                                                    wKeqR$   总结 – 组件…           |Gf{}   KFs` u6                                                                ,){0y%c#y   Y>#c2@^i<   *tO<wp&   Y@4vQm+   系统观感 )ED[cYGx   Ur-^X(nL                                                                    u9gr@06   XGoy#h   ;?o C=c   发射&损耗激光 f!J^vDl   $F-XXBp                                                                            $KKaA{0-   }6bLukv   光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 YiCDV(prT   1wgu%$|d                                                                                    lX4p'R-h   3D STED 轮廓 `SwnKg   <di_2hN                  J7_H.RPa                                                        qC4-J)8Wk   注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 _)l %-*Z7p   "P{&UwMmh   受激发射损耗效应                                                                           :}JZKj!}M   u7=[~l&L   为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 qc6IH9i`   V3oAZ34)   *[5   :65HMWy.   VirtualLab Fusion 技术                                                                           @,MdvR+a   ??m7xH5u1   2 QmUg                                                                                    Pp/{ keEye   文件信息 CP#79 =1   2jW>uk4/i   QB[s8"S   88>Uu!M=f   进一步阅读 >>$|,Q-.   • Simulation of Multiple Light Source in VLF ~qS/90,   • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy re!8nuBsA   gxOmbQt@;   市场图片 S |x)7NC   pNlisS

!_ Q!H2il

:xPvEK[B7