受激发射损耗(STED)显微镜原理

O^Y@&S RrQ   摘要 L'HO"EZFj   p'4ZcCW?f   XyYP!<].C                                                                      *RD<*l   受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 '$h0l-mQ   4Q(w D   任务说明                                                                           \2Yo*jE}   RveEA/&&   /u~L3Cp(   ^tL]QE?|   多重光源                                                                           a\m0X@Q      ;"2(e7ir   @NYlVk2   [{PmU~RMYf   螺旋相位板                                                                           ~? n)/i("   ]#;u]   vhrURY.    zB8J|uG   探测器插件                                                                           Ask ~   T5eJIc3a"   ^Sc48iDc   /Py`a1   参数运行 $r1{Nh   xJ^pqb                                                                            TOsHb+Uv   _#yd0E   为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： W]5sqtF;6   T,uJO<   Usage of the Parameter Run Document )U+&XjK                                                                                    08z? i   非时序建模 B/K {sI   3uuB/8                                                                          -+n?Q;   6C- !^8[f   将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 VrKFpFd   \4|osZ0y   Channel Setting for Non-Sequential Tracing Ym wb2]M                                                                                    SJO^.[   总结 – 组件…           nXW]9zC"/   |DUOyQ                                                                A}CpyRVCn   Lu[xoQ~I   w/wU~~   pW5PF)([   系统观感 SXRND;-W8   84c[Z                                                                    }/VSIS@Z   *}Gu'EU   R]y9>5 'U   发射&损耗激光 9=G dj!L   u4~(0                                                                            r'J3\7N!u   Cgn@@P5ZC   光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 e:(~=9}Li   @,SN8K0T                                                                                    K@@Jt   3D STED 轮廓 hJGWa%`   l?zWi[Zf                  {ud^+I&                                                        B:tGD@   注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 TmdRB8N   B=hJ*;:p   受激发射损耗效应                                                                           vA#?\j2   N0 &#fXO   为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 )q'~<QxI\   ;aUI3n%   !@@rO--&   ?r}!d2:dX   VirtualLab Fusion 技术                                                                           +( V+XT   P8;f^3V(+/   fa;GM7<e)                                                                                    ZUUfn~ORc   文件信息 QLAyX*%B   M^~   bHH=MLZR:   P7p'j   进一步阅读 91bJ7%   • Simulation of Multiple Light Source in VLF da53XEF&   • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy 4r>buEU   9{5 c}bX   市场图片 7`6JK   rFR2c?j8

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