受激发射损耗(STED)显微镜原理

l AF/O5b   摘要 TEC' }%    We z"E2J`   MRzrZZ%LQ                                                                      bo^d!/;   受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 -:92<G\D   +3B^e%`NPm   任务说明                                                                           d4@\5<   B^'Uh+Y   ]^9B%t s9   (x7AV$N   多重光源                                                                           _2*Ryz      Q}#5mf&cD   lLD-QO} /   V. sIiE   螺旋相位板                                                                           HD"Pz}k4   C~\/FrO?   {4u8~whLp   X ?p_O2#k   探测器插件                                                                           9$0-UUCk   OE,uw2uaT   V&)lS Qw   ejY|o Bj   参数运行 Vg1! u+`<   AEx|<E0                                                                            )3O0:]<H   { bjK(|   为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： NXhQdf   )*&I|L<1   Usage of the Parameter Run Document "52nT                                                                                    _H#l&bL@C   非时序建模 JI1O(   5fGUJ[F=                                                                          Y,1sNg   BaSNr6 YW   将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 gemjLuf   9A]XuPAlh   Channel Setting for Non-Sequential Tracing qK ,mG{                                                                                    (`0dO8   总结 – 组件…           #L\t)W   IT \Pj_                                                                6`LC(Nv%-n   H*U\P2C!)   W!a~ #R/r-   *|c*/7]<   系统观感 ?Z}n0E `   ~<0!sE&y                                                                    xJ"CAg| B   -"L)<J@gQ?   %I]?xe6   发射&损耗激光 f3h&K}x   R#Z1+&='                                                                            hv xvwV1   @a.Y9;O   光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 %]9 <a   Ed/@&52z0                                                                                    HLMEB0zh^   3D STED 轮廓 0`X%&   Zp|LCE"                  v2<roG6.V                                                        g%w@v$   注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 (]BZ8GOx   "4FL<6   受激发射损耗效应                                                                           EXz5Rue LV   tK&.0)*=   为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 LkFXUt?   6p/gvpZ   JL1%XQ i   kmM4KP#&|   VirtualLab Fusion 技术                                                                           b~ ?TDm7   P=&Je?   0|X!Uw-Q%_                                                                                    OT7F#:2`   文件信息 6Rn_@_Nn)f   t#|E.G:=   P[{w23`4   ^o't&   进一步阅读 :>lica_   • Simulation of Multiple Light Source in VLF >vg!<%]W]   • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy `4s5yNUi=   x_Ki5~w5   市场图片 5| 2B@6-   w <]7:/

Ms?V1

X|L8s$>