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infotek 2023-09-04 08:23

受激发射损耗(STED)显微镜原理

摘要 OtL~NTY  
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受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术,以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中,两束激光—一束正常,一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应,与通常的显微镜技术(例如,宽视场显微镜)相比,后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中,介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应,在焦点区域采用等效孔径。 XH0{|#hwN  
fC^d@4ha  
任务说明                                                                           bg3kGt0  
*C)m#[#:u  
eiOAbO#U  
ZK{1z|  
多重光源                                                                           ~mH'8K|l  
   56."&0  
6;I zw$X  
LVP6vs  
螺旋相位板                                                                           5Q}HLjG8Z  
; mV>k_AG  
mMZ=9 ?m  
S% ptG$Z  
探测器插件                                                                           y54RD/`-  
Qmd2C&Xw  
/jaO\t'q  
`h'Ab63  
参数运行 !`U #Pjp.  
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4wS!g10}  
muK)Y w[#N  
为了实现焦点区域的z-扫描,可以执行参数运行。使用此工具,用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息,请参阅: F":dS-u&L  
R$/q=*k  
Usage of the Parameter Run Document `ER#S_}  
                                                                                 Oa5-^&I  
非时序建模 O>wGJ.  
kYS\TMt,C  
                                                                      
UA0R)BH'  
bnp:J|(ld  
将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后,用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时,将对活动光路进行初步分析(通过所谓的Light Path Finder)。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 z1e+Ob&  
odeO(zuU  
Channel Setting for Non-Sequential Tracing ='/#G0W  
                                                                                 5',b~Pp  
总结 – 组件…           H'2o84$  
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R'1"`@f G  
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系统观感 4=ha$3h$  
2Q/V D,yU  
                                                                
l~`JFWur]  
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_ZuI x=!  
发射&损耗激光 GsWf$/iC:  
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KU0;}GSNX}  
光在焦点区域中的传播表明,来自损耗激光的光会产生环形光斑,其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争,这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 b@1";+(27  
-uK@2} NZ  
                                                                                 5sMyH[5zY  
3D STED 轮廓 sr.!EQ]  
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               #fe zUU  
                                                    
H`U>ZJ.  
注意:由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应,我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 ^W,x  
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受激发射损耗效应                                                                           4vPKDd  
 2Y9@[  
为了近似饱和损耗的影响,我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓(600nm 直径,25% 边缘)。通过系统传播回探测器平面表明,由于这个过程,光斑变得非常小。 }l@7t&T|  
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VirtualLab Fusion 技术                                                                           ^d/,9L\U  
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文件信息 kv3V|  
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进一步阅读 +QFY. >KH  
• Simulation of Multiple Light Source in VLF
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• Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy _;5N@2?  
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